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三聚氰胺檢測液相色譜儀固相萃取法

更新時間:2017-02-17      點擊次數:2974

       三聚氰胺,俗稱密胺、蛋白精,是一種重要的化工原料,沒有任何營養價值,是國家禁止在食品或飼料中使用的添加物,但因其含氮量高達66%,被一些造假者利用,添加在飼料或食品中,造成蛋白質含量高的假象,以獲得更*,如果蛋雞長期食用含有三聚氰胺的飼料,會導致雞蛋中殘留三聚氰胺。研究表明,三聚氰胺會造成生殖、泌尿系統的損害,膀胱以及腎部的結石,并可進一步誘發膀胱癌。

三聚氰胺檢測液相色譜儀固相萃取法主要儀器設備

液相色譜儀,紫外檢測器,SPE固相萃取裝置,渦旋振蕩儀,氮氣吹干儀,真空泵,高速離心機,電子天平。

試劑材料

市售巧克力,三聚氰胺標品,乙腈(色譜純),甲酸、氨水、甲醇、庚烷磺酸鈉、檸檬酸(均為分析純)。

色譜柱:ATEO-C18(5 μm,120 Å,4.6×250 mm,

SPE柱:AE.SPE-MCX(60 mg/3 mL)

  

三聚氰胺檢測液相色譜儀固相萃取法樣品提取

      取5 g粉碎巧克力樣品,加入20 mL 50%乙腈水溶液混合,渦旋振蕩10 min,6000 r/min 離心5 min,取上清液待凈化。

SPE柱凈化

(1)活化:分別用3 mL甲醇、3 mL 4%甲酸水活化固相萃取柱。

(2)上樣:將提取液加入小柱中,以≦1 mL/min的流速過柱,棄去濾液。

(3)淋洗:依次用3 mL水、3 mL甲醇淋洗,淋洗液棄去。

(4)洗脫:用3 mL 5%氨水甲醇溶液洗脫,收集洗脫液。

(5)重新溶解:50℃下氮吹吹干后,用20% 甲醇水溶液溶解并定容至1 mL,0.45μm濾膜過濾,供HPLC檢測。

 

液相色譜條件

色譜柱:ATEO-C18(250 * 4.6 mm,5 μm)

檢測器:UV2996型紫外/可見光檢測器

檢測波長:UV 240 nm                

流動相:緩沖溶液*/乙腈 = 92/8(v/v)          

流速:1.0 mL/min

柱溫:30 ℃                 

進樣量:20 μL

緩沖溶液:分別稱取2.02 g庚烷磺酸鈉、2.10 g檸檬酸鈉,用水定容至1 L。

 

三聚氰胺檢測液相色譜儀固相萃取法分析結果

 

      采用,添加回收率達92.27%,表明使用AE.SPE-MCX固相萃取柱及ATEO-C18柱,可快速可靠地檢測巧克力中的三聚氰胺。

 

 

 

 

 

 

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